據(jù)m.x4y7.cn小編了解,隨著微生物技術(shù)的發(fā)展和對人體免疫機制的了解的深入,對于疫苗的功能又提出了新的要求:能不能只需要注射一種疫苗而獲得對抗多種病原的免疫能力呢?于是科學(xué)家們再一次把目光轉(zhuǎn)向了基因工程,通過基因重組的方式將不同來源病原的關(guān)鍵抗原基因整合到單個疫苗中,構(gòu)建了符合要求的活載體疫苗。
國外已經(jīng)研制出了相關(guān)的疫苗,如以腺病毒為載體的乙肝疫苗和以皰疹病毒作為載體的新城疫疫苗,為多價苗和連苗開辟了新途徑。從目前的生產(chǎn)和研究過程來看,多選用牛痘病毒、皰疹病毒和腺病毒等病毒為載體,其中以牛痘病毒居多。牛痘病毒胸苷激酶基因可以插入大量外源保護性抗原基因,高達25kb。其實,牛痘病毒是我們應(yīng)用最早的疫苗,這就是為什么疫苗的英文詞為vaccine,而牛痘的英文詞為vaccina了。在牛痘幫助人類消滅了天花后,其使命并沒有停止,現(xiàn)在正在被應(yīng)用于重組疫苗的研制和生產(chǎn)。
其大致方法是:將目標(biāo)抗原基因克隆在大腸桿菌載體上,置于牛痘病毒啟動子下游。胸苷激酶基因被插入的啟動子和多克隆位點破壞。利用牛痘病毒和重組質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染,發(fā)生特異性同源重組,質(zhì)粒攜帶的牛痘啟動子的外源抗原基因整合到病毒dna中,表達目標(biāo)抗原。
重組牛痘病毒已被大量用于制備各種病毒或者其他病原的抗原,如歐洲開發(fā)的狂犬病毒口服疫苗,還被致力于重組獲得更多不同來源的抗原基因的構(gòu)建表達。
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