據(jù)m.x4y7.cn小編了解,體外定點突變技術的應用廣泛,具有很大的發(fā)展?jié)摿。例如研究蛋白質(zhì)之間的相互作用關系,對酶進行改造,或者改造啟動子和作用元件,還有就是它在藥物的研發(fā)和基因治療上意義重大,是構建醫(yī)藥實驗模型的強有力工具。研究人員常常利用定點突變技術對已知基因進行堿基的定點改變,切除或者插入,亦或者替換,從而獲得新的基因表達產(chǎn)物,在分子和基因水平上對生物活動和致病機理做出解釋。
在單個定點突變上,stratagene公司的產(chǎn)品quikchange site-directed mutagenesis kit,是目前最好的選擇,因為它運用很巧妙的設計將質(zhì)粒的定點突變變得更加簡單和有效。這種試劑盒中使用的pfu聚合酶是目前保真性最好的酶,被科研工作者所認同。
但是在實際的科學研究中,單個位點的突變往往不能滿足研究的需要,因此研究人員迫切需要一種可以引起多個定點突變的產(chǎn)品。stratagene公司推出的quikchange multi site-directed mutagenesis kit一次可以引入五個定點突變,讓多點突變變得更加方便快捷。
還有一種隨機突變的方法,它是根據(jù)pcr的條件改變所帶來的隨機出錯,從而得到新的突變。這種方法適用于研究未知蛋白,被稱為飽和突變。這種沒有目的性的方法,操作上麻煩。因此更加有針對性的定點突變技術如單點突變技術和多點突變技術已經(jīng)成為了研究的主流方法。
相信,這項技術在醫(yī)藥研發(fā)和疾病研究中會發(fā)揮更多的作用。
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